绵羊成纤维细胞及精子Sox2基因启动子甲基化状态检测

作者:陈胜男; 宋红卫; 李松美; 朴善花; 王春生*
来源:黑龙江畜牧兽医, 2020, (01): 22-26.
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.03.0288

摘要

为了探明绵羊成纤维细胞及精子中Sox2基因启动子甲基化状态的差异,试验对绵羊Sox2基因启动子进行序列查询和甲基化岛分析,提取绵羊成纤维细胞和精子基因组,用重亚硫酸盐处理,进行甲基化特异性PCR、连接和酶切鉴定,最终分别随机选取10个测序结果进行甲基化状态分析,比较二者的甲基化状态。结果表明:在精子的350个甲基化位点中,有194个位点处于非甲基化状态,156个位点处于甲基化状态,甲基化率为44.6%;在成纤维细胞的350个甲基化位点中,93个位点处于非甲基化状态,257个位点处于甲基化状态,甲基化率为73.4%;χ2检验表明二者的甲基化状态差异极显著(P<0.01)。说明绵羊精子和成纤维细胞的Sox2基因启动子区域甲基化状态存在较大差异。