高效液相色谱-串联质谱法测定血液中草铵膦及其代谢物3-甲基膦基-丙酸的含量

作者：王学虎; 袁敏

来源：理化检验. B, 化学分册, 2023, 59(10): 1123-1128.

• 高效液相色谱-串联质谱法
• 草铵膦
• 代谢物
• 3-甲基膦基-丙酸

利用两份口服草铵膦中毒死者提取的心血样本，分析了人体内草铵膦代谢物的存在情况，明确了草铵膦中毒死者血液的检测目标物为草铵膦及其主要代谢物3-甲基膦基-丙酸，并提出了高效液相色谱法-串联质谱法测定血液中草铵膦及其代谢物3-甲基膦基-丙酸含量的方法。在血液、水、乙腈的体积比为1∶0.5∶3条件下沉淀蛋白，获取上清液后添加与乙腈体积相同的二氯甲烷，涡旋、离心，上层水相经0.22μm水相滤膜过滤，所得滤液注入高效液相色谱仪。以价格低廉的Dikma Polyamino HILIC色谱柱(150 mm×2.0 mm, 5μm)为固定相，以含5 mmol·L-1乙酸铵的1.25%(体积分数)氨水溶液-乙腈为流动相体系进行梯度洗脱；分离后的目标物经电喷雾离子源负离子模式扫描，多反应监测模式检测，以基质匹配法定量。结果显示：草铵膦和3-甲基膦基-丙酸工作曲线的线性范围均为0.2～10.0 mg·L-1,检出限(3S/N)均为0.1 mg·L-1;对空白心血进行3个浓度水平的加标回收试验，草铵膦和3-甲基膦基-丙酸的回收率分别为35.6%～50.1%和50.6%～70.1%,日内精密度(n=6)分别为5.7%～8.7%和6.9%～8.9%,日间精密度(n=6)分别为5.7%～6.3%和4.2%～9.6%;对两份实际案例的血液检材进行定量分析，其中草铵膦质量浓度为5.8 mg·L-1和7.5 mg·L-1,代谢物3-甲基膦基-丙酸质量浓度为5.3 mg·L-1和5.8 mg·L-1。