咪唑安定通过调控miR-4458/NF-κB通路影响结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

作者：刘爱芬; 王辉^*; 王晓鹏

来源：国际医药卫生导报, 2021, 27(11).

• 咪唑安定
• 结肠癌
• miR-4458
• NF-κB
• 细胞增殖
• 迁移
• 侵袭

目的研究咪唑安定对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响, 并探讨其机制是否与调控微小RNA-4458(miR-4458)/核因子κB(nuclear factor κB, NF-κB)通路有关。方法本研究于2019年12月至2020年10月开展实验。用不同浓度咪唑安定处理结肠癌细胞SW620, 噻唑蓝法、Transwell实验检测SW620细胞增殖、迁移和侵袭, 蛋白质印迹法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)、MMP9、磷酸化的NF-κBp65(phosphorylated NF-κB p65, p-p65)和磷酸化的NF-κB抑制蛋白-α(phosphorylated NF-κB inhibitory protein-α, p-IкBα)表达, 实时定量聚合酶链反应分析miR-4458表达。转染miR-4458抑制物至SW620细胞, 采用上述方法评估抑制miR-4458表达对SW620细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果咪唑安定处理显著降低SW620细胞增殖活力[(0.843±0.05)、(0.611±0.04)、(0.527±0.03)比(1.089±0.07)]、迁移能力[(147±10.49)个、(117±8.06)个、(83±6.13)个比(179±13.07)个]和侵袭能力[(113±8.67)个、(89±4.71)个、(61±3.79)个比(136±9.14)个](均P<0.05), 并下调CyclinD1[(0.70±0.05)、(0.51±0.03)、(0.44±0.03)比(0.83±0.07)]、MMP2[(0.73±0.05)、(0.56±0.04)、(0.45±0.03)比(0.91±0.07)]、MMP9[(0.58±0.04)、(0.41±0.03)、(0.34±0.02)比(0.76±0.06)]、p-p65[(0.70±0.05)、(0.57±0.04)、(0.43±0.03)比(0.83±0.07)]和p-IкBα[(0.61±0.04)、(0.48±0.04)、(0.37±0.02)比(0.71±0.05)]蛋白的表达(均P<0.05), 上调miR-4458[(1.43±0.10)、(1.89±0.15)、(2.01±0.14)比(1.00±0.08)]表达(均P<0.05)。抑制miR-4458表达显著增加SW620细胞增殖活力[(1.428±0.11)比(1.093±0.08)]、迁移能力[(237±19.76)个比(183±14.55)个]和侵袭能力[(179±14.12)个比(131±8.14)个](均P<0.05), 上调CyclinD1[(1.37±0.11)比(0.85±0.06)]、MMP2[(1.58±0.12)比(0.93±0.08)]和MMP9[(1.11±0.09)比(0.77±0.06)]蛋白表达(均P<0.05)。抑制miR-4458表达可减弱咪唑安定对SW620细胞增殖活力[(0.978±0.07)比(0.534±0.04)]、迁移能力[(173±9.84)个比(87±5.73)个]、侵袭能力[(143±11.04)个比(65±4.13)个]以及CyclinD1[(0.81±0.06)比(0.43±0.02)]、MMP2[(0.89±0.08)比(0.48±0.03)]和MMP9[(0.75±0.05)比(0.36±0.02)]蛋白表达的抑制作用(均P<0.05)。抑制NF-κB通路可逆转抑制miR-4458表达对咪唑安定处理的SW620细胞增殖[(0.547±0.03)比(0.978±0.07)]、迁移[(76±4.19)个比(173±9.84)个]和侵袭[(61±4.05)个比(143±11.04)个]的影响(均P<0.05)。结论咪唑安定通过上调miR-4458和抑制NF-κB活化对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭产生抑制作用。

• 单位
  天津市公安医院; 天津医科大学第二医院