猪链球菌2型ABC转运蛋白gene0910敲除突变体的构建及活性分析

作者：骈亚亚; 郭洁; 郑玉玲; 袁媛; 姜永强

来源：现代生物医学进展, 2010, (01): 6-10.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2010.01.001

• 猪链球菌2型
• 89K毒力岛
• ABC转运蛋白
• 基因敲除 Streptococcus suis type 2
• 89 K pathogenicity island
• ABC transporter
• Gene knock-out

目的:构建猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)强毒株05ZYH3389K毒力岛上的ABC转运蛋白gene0910敲除突变体,并初步分析其活性,为进一步研究猪链球菌假想毒力因子在致病中的作用提供实验基础。方法:以猪链球菌2型05ZYH33基因组为模板,扩增gene0910两侧各约500bp左右的片段为上下游同源臂,以pSET1质粒为模板,扩增氯霉素抗性基因Cm为中间片段,采用重叠PCR方法搭建三个片段,并克隆到自杀载体pSET4S上,构建基因敲除的载体。电转化05ZYH33感受态细胞,经30℃双交换和40℃质粒丢失,最后点板法筛选出基因敲除突变体△0910。对突变株...

• 单位
  华中农业大学; 军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室