敲低WDSUB1通过抑制NF-κB通路减轻实验性小鼠结肠炎

作者：王少鑫; 崔立红^*; 刘新尧; 罗哲; 李辉; 浦江

来源：南方医科大学学报, 2022, 42(08): 1119-1125.

• WDSUB1
• 葡聚糖硫酸钠
• 结肠炎
• NF-κB

目的 采用体内转染小干扰RNA(siRNA)和口服葡聚糖硫酸钠（DSS）的方法构建小鼠结肠炎模型，研究WDSUB1对小鼠结肠炎症损伤的影响并探讨可能的机制。方法 在小鼠成纤维细胞L929中转染不同的WDSUB1 siRNA序列，采用Western blotting (WB)检测的方法，选择WDSUB1敲低效果最佳的siRNA序列进行小鼠体内转染实验。选择12只雄性C57BL/6小鼠随机进行尾静脉注射siRNA(siWDSUB1/siControl)，口服2.5%DSS饮用水，构建两组DSS诱导的结肠炎小鼠模型，根据siRNA不同，分为WDSUB1敲低组和对照组，6只/组。通过WB和RT-PCR方法验证两组小鼠结肠组织中WDSUB1的表达水平，记录实验过程中结肠炎小鼠的体质量及粪便性状，并进行临床症状评分。采用RT-PCR和WB方法，分别检测两组结肠炎恢复期小鼠结肠组织中炎性因子IL-6,COX-2,TNFα的m RNA表达水平，以及NF-κB通路中IκBα和P65的表达变化。结果 L929细胞中转染不同WDSUB1 siRNA序列后，选择敲低效果最佳的WDSUB1 2#完成体内转染，构建结肠炎小鼠模型。RT-PCR和WB结果均表明，WDSUB1敲低组小鼠的结肠组织中WDSUB1 mRNA和蛋白表达均明显低于对照组（P<0.05）。在分析两组小鼠结肠炎症状时，WDSUB1敲低组结肠炎小鼠的体质量丢失明显少于对照组，腹泻和便血程度较对照组也明显减轻（P<0.05）。WDSUB1敲低组小鼠结肠组织中COX-2,IL-6和TNFα mRNA均明显低于对照组（P<0.05），且IκBα表达明显受抑制，而p65表达无明显变化。结论 敲低WDSUB1能够减轻实验性小鼠结肠炎症程度，此过程可能是通过抑制NF-κB通路和炎性因子表达实现的。

• 单位
  解放军总医院