优化第三代慢病毒载体稳定表达β-珠蛋白治疗β-地中海贫血的研究

作者：于榛; 仝帅; 白玥; 钟晓松^*

来源：中国实验血液学杂志, 2022, 30(03): 844-850.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022.03.029

• β-珠蛋白
• 慢病毒
• β-地中海贫血
• 基因治疗

目的:优化第三代慢病毒载体HS4区实现β-珠蛋白稳定表达，为β-地中海贫血安全有效的细胞治疗提供研究依据。方法:优化第三代慢病毒表达载体HS4区构建lenti-HBB;转染小鼠红白血病细胞系MEL后，通过RT-PCR、Western-blot分析β-globin基因转录及翻译情况；进一步通过正常人脐带血及重型β-地中海贫血患者外周血CD34+细胞感染lenti-HBB,经克隆形成实验、细胞涂片实验及流式细胞术检测CD34+细胞是否发生红系分化；通过NSG小鼠体内实验验证lenti-HBB的安全性及有效性。结果:小鼠MEL细胞感染优化后的lenti-HBB后能稳定表达β-珠蛋白；正常人脐血及重度β-地中海贫血患者外周血CD34+细胞感染优化后的lenti-HBB后可分化为红细胞；人CD34+细胞感染优化后的lenti-HBB移植NSG小鼠3.5个月后表达β-珠蛋白。结论:通过优化第三代慢病毒载体HS4区稳定表达CD34+细胞β-珠蛋白，对重型β-地中海贫血及其他β-珠蛋白异常疾病是安全有效的。

• 单位
  首都医科大学附属北京世纪坛医院