摘要
目的研究HPV-16E7抗原肽负载的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞共培养Ag-DC-CIK对人宫颈癌细胞siha的杀伤效应。方法采集健康人外周血,分离提取单个核细胞(PBMC),分别诱导生成DC和CIK细胞,观察细胞形态,流式细胞仪检测DC摄取能力及其表面分子CD83、CD86和CIK细胞CD3、CD8、CD56的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平。实验分为5组:效应细胞CIK、DC-CIK、Ag1-DC-CIK、Ag2-DC-CIK、AgM-DC-CIK,分别与靶细胞siha共培养,细胞计数试剂盒(CCK8)法检测效应细胞对siha活性的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测效应细胞对siha的杀伤效应。结果 DC成熟后,摄取能力减弱,CD86、CD83表达上调,上清液中IL-12水平增高;与DC共培养的CIK细胞,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例提高,分泌IFN-γ能力增强;与CIK细胞、DC-CIK组相比,Ag1-DC-CIK、Ag2-DC-CIK、AgM-DC-CIK组均表现出对siha细胞更强的杀伤效应。结论成功构建AgDC-CIK共培养体系,获得两组有效的HPV-16E7蛋白抗原肽,为治疗宫颈癌提供了新思路。
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单位上海市嘉定区妇幼保健院