半自动消化法分离纯化人胰岛细胞的实验研究

作者:张桦; 蔡德鸿; 韩钧凌; 卫国红; 孙嘉; 孙卫平; 张剑; 陈宏; 曾龙驿; 翁建平
来源:南方医科大学学报, 2007, (06): 824-826.
DOI:10.3321/j.issn:1673-4254.2007.06.046

摘要

目的探索用半自动胰腺消化系统建立大规模人胰岛细胞纯化的可靠方法。方法使用自制的半自动人胰腺消化分离装置及胶原酶P进行人胰腺的消化分离,用COBE2991细胞分离机及HCA-Ficoll纯化人胰岛细胞。通过DTZ染色,在倒置显微镜下计数胰岛细胞的数量和纯度,用胰岛素释放试验检测胰岛细胞的分泌功能。结果消化后平均每条胰腺可平均获得(386201±78219)个胰岛细胞当量(IEQ),纯化后平均每条胰腺可获得231420±28054IEQ,平均每克胰腺组织可获得(3148±317)IEQ,纯化后胰岛细胞平均纯度为(62.81±2.68)%。纯化后的胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖(16.7mm...

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