DLC2在结直肠癌中的表达和对结直肠癌细胞凋亡的影响

作者：齐翀; 洪亮; 李亮; 蔡元坤

来源：中国中西医结合消化杂志, 2018, 26(05): 420-425.

• 结直肠癌
• 凋亡
• 肝癌缺失基因2
• p38

[目的]探讨肝癌缺失基因2(DCL2)在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞凋亡的影响。[方法]收集结直肠癌组织及对应的癌旁组织,培养人结直肠癌细胞HCT116、HT29、Caco2和人正常肠上皮细胞FHC,Western blot检测组织及细胞中DLC2表达水平。结直肠癌细胞转染DCL2过表达载体(过表达组)和空载体(阴性组),以只加入转染试剂的细胞为对照组,Western blot检测转染后细胞中DCL2、p38、磷酸化的p38(p-p38)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Cleaved Caspase-3)表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况。[结果]癌组织中DLC2的表达水平明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=12.363,P=0.000)。HT29、HCT116、Caco2细胞中DLC2的表达水平明显低于FHC细胞,差异具有统计学意义(t1=8.624,t2=9.385,t2=10.322,P=0.000)。Caco2(0.06±0.03)细胞中DLC2的表达水平明显低于HT29、HCT116,差异具有统计学意义(t1=8.676,t2=7.645,P=0.000)。后续实验选用Caco2细胞继续研究。阴性组DLC2的表达水平与对照组相比,差异没有统计学意义(t1=2.325,P>0.05)。过表达组DLC2的表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(t1=13.545,P=0.000)。阴性组细胞凋亡率与对照组相比,差异没有统计学意义(t1=1.646,P>0.05)。过表达组细胞凋亡率明显高于对照组,差异具有统计学意义(t1=36.256,P=0.000)。阴性组、过表达组与对照组细胞中p38表达水平没有明显变化(t1=2.335,t2=1.464,P>0.05)。阴性组与对照组细胞中p-p38表达水平没有明显变化(t1=4.587,P>0.05)。阴性组与对照组细胞中Cleaved Caspase-3表达水平没有明显变化(t1=2.673,P>0.05)。过表达组与对照组细胞中p-p38表达水平相比明显升高,差异有统计学意义(t1=9.617,P=0.000)。过表达组与对照组细胞中Cleaved Caspase-3表达水平相比明显升高,差异具有统计学意义(t1=10.696,P=0.000)。[结论]DLC2在结直肠癌中表达下调,DLC2可能通过作用于p38信号通路促进人结直肠癌细胞凋亡。

• 单位
  复旦大学; 上海市第五人民医院