tRNAval-shRNA表达框在筛选HBV C基因小干扰RNA靶位中的应用

作者：潘修成; 陈智; 倪勤; 羊正纲; 徐宁; 金晗英

来源：浙江大学学报(医学版), 2006, (2): 154-160.

DOI：10.3785/j.issn.1008-9292.2006.02.008

• 肝炎病毒
• 乙型
• 基因
• shRNA表达框
• 小干扰RNA
• 筛选
• HBV C基因

目的:以tRNAva1-shRNA表达框技术筛选高效的HBV C基因siRNA靶位.方法:针对HBV C基因序列设定5个siRNA靶位,以一步重叠延伸PCR技术生成含tRNAva1启动子的shRNA表达框(SEC),分别与HBV C基因与EGFP融合表达质粒(pC-EGFP)共转染AD293细胞,转染后48 h,流式细胞术检测融合基因荧光表达情况,半定量RT-PCR法检测HBV-C基因mRNA

• 单位
  浙江大学医学院附属第一医院