FGF21腺病毒表达载体的构建及鉴定

作者：严莉莉; 项丽; 庞实锋; 段杏华; 曹定国; 梁朋; 张国平; 丁银润; 胡传银; 郑克勤

来源：广东医学院学报, 2015, 33(01): 39-44.

• 腺病毒
• 成纤维细胞生长因子
• 基因治疗

目的构建成纤维生长因子21(FGF21)表达载体。方法将FGF21基因克隆到腺病毒穿梭质粒p AdTrack经DH5α感受态菌扩增,Pme I酶切后热激转化到含腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1的BJ5183感受态菌内同源重组,经卡那霉素筛选及Pac I酶切鉴定,并在DH5α菌中扩增得到Ad-FGF21重组腺病毒质粒,再经Pac I酶切线性化后转染到293A细胞包装成重组腺病毒。结果基因测序结果表明成功合成穿梭载体p Ad-Track-FGF21。PCR和酶切鉴定结果证实含FGF21基因的重组腺病毒表达载体构建成功。Ad-FGF21转染293A细胞并制备出高滴度的重组腺病毒。结论利用腺病毒表达载体获得了携带FGF21的重组腺病毒表达载体。

• 单位
  惠阳三和医院; 广东医科大学