一种简单快速分离纯化小型猪胰岛的方法

作者：马昭杰; 蔡徳鸿; 张桦; 孙嘉; 王先宝; 陈宏

来源：广东医学, 2009, 30(04): 520-522.

DOI：10.3969/j.issn.1001-9448.2009.04.009

• 小型猪
• 胰岛细胞
• 分离
• 纯化
• 单密度梯度法

目的探索一种简单快速分离纯化小型猪胰岛的方法。方法摘取小型猪胰腺,经胰管插管后注入胶原酶V,用自制的半自动消化分离装置消化,胰腺消化物经自制的推进式离心管及单一密度(1.096g/mL)的Ficoll400纯化后行双硫腙(DTZ)染色,倒置显微镜下观察计数胰岛的数量及纯度,胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能。结果纯化后平均每克小型猪的胰腺可以获得(2645±234)IEQ(胰岛细胞当量),平均纯度为(74.2±5.1)%。纯化后的胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖时的胰岛素释放量为低糖时的3.14倍(P<0.01)。结论采用自制的半自动消化分离装置及单密度梯度法对小型猪胰岛进行分离纯化,为小型猪胰岛细胞的研究建立了一种简单快速分离纯化胰岛的方法,纯化后的胰岛细胞功能良好。

• 单位
  南方医科大学珠江医院