摘要
目的 探讨抗Trop-2 IgG抗体联合顺铂对卵巢癌上皮细胞的影响。方法 转染Trop-2质粒至293F细胞,利用Protein A亲和柱纯化,获得人源抗Trop-2 IgG抗体。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Trop-2质粒转染效率;聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)鉴定抗Trop-2 IgG抗体纯化效率;分子互作Biacore T100检测抗Trop-2 IgG抗体与Trop-2抗原的亲和力。蛋白免疫印迹、流式细胞术和免疫荧光检测HO8910细胞和Iose 386细胞中Trop-2蛋白表达水平。实验分为4组:磷酸盐缓冲液(PBS)组、Trop-2 IgG组、cisplatin组、Trop-2 IgG+cisplatin组。CCK8检测卵巢癌细胞存活率,Transwell检测卵巢癌细胞迁移和侵袭能力。结果 成功转染并纯化人源抗Trop-2 IgG抗体,并且其与Trop-2具有较高的结合力和免疫活性。抗Trop-2 IgG抗体在HO8910细胞中高表达,在Iose 386细胞中不表达。当顺铂存在时,Trop-2蛋白表达水平在HO8910细胞中高于Iose 386细胞,差异有统计学意义(P <0.05),并且Iose 386细胞中Trop-2蛋白表达水平不受影响。在HO8910细胞中,与PBS组相比,Trop-2组细胞存活率显著降低,且随着时间的增加,存活率逐渐降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。与cisplatin组相比,Trop-2 IgG+cisplatin组中HO8910细胞和Iose 386细胞存活率都降低,差异有统计学意义(P <0.05)。在HO8910细胞中,与PBS组相比,其余3组细胞迁移和侵袭能力降低,并且Trop-2 IgG+cisplatin组中迁移和侵袭细胞数量少于cisplatin组,差异均有统计学意义(P <0.05);而在Iose 386细胞中无效果。结论 抗Trop-2 IgG联合顺铂后可特异性识别卵巢癌细胞表面的Trop-2抗原,且能加强顺铂对HO8910细胞的抑制效果,为卵巢癌抗体-药物偶联物的开发和靶向治疗提供了思路。
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单位南京市妇幼保健院; 南京医科大学