丙酮酸激酶通过靶向Bcl-2家族参与脂多糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡

作者：赵延芳; 胡锦秀; 王荣^*

来源：免疫学杂志, 2020, 36(05): 390-396.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20200063

• 丙酮酸激酶2
• Bcl-2家族
• HK-2细胞
• 脂多糖
• 凋亡

目的探讨丙酮酸激酶2(PKM2)在脂多糖(LPS)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡中的作用及分子机制。方法采用不同质量浓度的脂多糖作用于HK-2细胞,利用CCK-8实验检测细胞存活率;利用Real-time PCR、Western blot检测HK-2细胞中PKM2的mRNA及蛋白表达水平;利用Western blot检测Bcl-2家族关键蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)以及细胞色素C(Cytochrome C)的表达;利用Annexin-PE/7AAD双染法分析细胞凋亡水平;利用流式细胞术PI染色法检测细胞周期,并结合PKM2抑制剂,深入探讨PKM2在其中的作用及机制。结果脂多糖可诱导HK-2细胞损伤,使其活性降低、周期阻滞、凋亡增加,且可检测到Bcl-2家族关键蛋白的表达改变:Bcl-2降低、Bax增高,同时伴Cytochrome C增加。脂多糖可诱导PKM2表达增加,而使用PKM2抑制剂后,进一步增加了HK-2细胞凋亡以及细胞G1-S期阻滞,伴Bcl-2显著降低,Bax、Cytochrome C显著增加。结论脂多糖诱导HK-2细胞活力下降,周期阻滞,凋亡增加,PKM2可以通过靶向Bcl-2家族参与脂多糖诱导的HK-2细胞凋亡。

• 单位
  山东大学