科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
UDP-糖基转移酶（UDP-glycosyltransferase， UGT），又称尿苷二磷酸糖基转移酶，是三萜类皂苷生物合成途径中负责皂苷骨架糖基化修饰的关键酶。本实验以六年生野生珠子参（Panax japonicus var. major）根茎为材料，基于珠子参转录组数据，通过PCR克隆得到1个UGT基因，命名为PjvmUGT1。该基因序列全长为1 781 bp，包含一条编码453个氨基酸的1 362 bp长的完整开放阅读框（open reading frame， ORF）。该编码序列被成功构建到了pET-28a载体上。基于生物信息学的方法对基因的编码蛋白进行分析，蛋白分子质量为51.22 kD，等电点为6.01，亮氨酸（Leucine）含量高达9.9%，不稳定指数为51.22，脂肪指数为88.41。蛋白序列分析表明，PjvmUGT1为亲水性蛋白，不含有跨膜区。该蛋白序列包含40处磷酸化位点，7处糖基化位点，2种高度保守的糖基转移酶功能域。二级结构预测表明，该蛋白主要由α-螺旋（39.96%）和无规则卷曲（39.96%）构成。通过与人参属（Panax）中22个已知功能的UGT进行多序列比对分析，发现其C-端都具有PSPG-Box。系统发育分析表明，PjvmUGT1与Pq3-O-UGT2、UGT94Q2和UGTPg29聚类关系较近，可能具有催化Rh2生成Rg3的功能。实时荧光定量PCR的结果表明，该UGT候选基因在珠子参根茎的茎节和节间上有差异表达，其在茎节中显著上调表达。该研究将为进一步挖掘珠子参中具有功能的UGT基因提供科学依据。
- 单位
