犬瘟热病毒H蛋白与RIG-I互作抑制β干扰素转录活性的研究

作者：毕振威^*; 王文杰; 钱晶; 王晶宇; 谭业平; 夏兴霞; 诸玉梅; 王永山

来源：中国兽医科学, 2021, 51(10): 1279-1286.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0152

• 犬瘟热病毒
• H蛋白
• RIG-I
• β干扰素
• 相互作用

为研究犬瘟热病毒(CDV)H蛋白对β干扰素信号通路的影响,构建不同CDV毒株H蛋白真核表达质粒以及CDV H蛋白不同截短体真核表达质粒,分别与β-IFN-Luc基因报告质粒和内参质粒pRL-TK共转染细胞,用双荧光素酶报告基因试剂盒检测CDV H蛋白对仙台病毒(SeV)诱导β干扰素的影响以及RIG-I(N)、MAVS、TBK1和IKK-i等信号分子在H蛋白介导的β干扰素转录活性的作用,通过激光共聚焦试验和GST-pull down试验检测CDV H蛋白与RIG-I(N)的相互作用。结果,CDV2野毒株H蛋白能够特异地抑制SeV感染诱发的β干扰素转录活性,而且这种抑制作用与RIG-I(N)激活相关。激光共聚焦试验显示,CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)在细胞质中存在共定位现象;GST-pull down试验证明了CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)存在直接的相互作用;H蛋白截短表达试验证明其N端结构域(1-462 bp)是抑制β干扰素转录活性的关键结构域。本项目的成功开展为深入研究CDV H蛋白抗宿主天然免疫机制奠定了基础,对该病的预防和治疗具有重要意义。

• 单位
  农业部; 江苏省农业科学院