一种适合二糖苷转移功能的重组右旋糖酐蔗糖酶大肠杆菌的构建方法

作者：张洪斌; 余晓琴; 杨静文; 胡雪芹; 丁晓洁

来源：2020-11-09, 中国, ZL202011238363.0.

本发明公开了一种适合二糖苷转移功能的重组右旋糖酐蔗糖酶大肠杆菌的构建方法,以P473S/P856S双突变的热稳定型右旋糖酐蔗糖酶基因为模板,将555位点天冬酰胺突变为谷氨酰胺后重组转化到BL21(DE3)大肠杆菌中获得的适合二糖苷转移功能的重组右旋糖酐蔗糖酶大肠杆菌BL21(DE3)/dex-YG-TrMU202001基因工程菌。本发明构建的dex-YG-TrMU202001基因工程菌合成的糖苷产物单一,且转化率高,分离纯化简单,同条件下,经产率计算发现,本发明构建的dex-YG-TrMU202001基因工程菌能将大部分咖啡酸苯乙酯转化为2G-咖啡酸苯乙酯,二糖苷产率由原来的24％提高到了84％,且反应液中无原料剩余,二糖苷产物提高了3.46倍。