YKL-40在激光诱导的小鼠脉络膜新生血管模型中的表达及意义

作者：宾玥; 刘彦尧; 丁琳; 彭惠

来源：重庆医科大学学报, 2018, 43(06): 863-868.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.001719

• YKL-40
• 血管内皮生长因子
• 脉络膜新生血管
• 年龄相关性黄斑变性

目的:探讨在激光诱导的小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型中几丁质酶-3样蛋白-1(chitinase-3-like-1,YKL-40)的表达及意义。方法:将40只成年雄性C57BL/6J小鼠以随机数字表法按照造模后取材时间的不同随机分为光凝后7 d组和14 d组,各20只。设定每组小鼠左眼为正常对照眼,右眼通过532 nm激光光凝视网膜诱导小鼠脉络膜新生血管模型,分别于光凝后7 d和14 d心脏灌注2×106F1TC-dextran荧光素,行视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)/脉络膜复合体铺片以及苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)鉴定CNV模型。采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视网膜神经层(简称神经视网膜)和RPE/脉络膜复合体中YKL-40与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的m RNA水平变化。免疫荧光染色法观察YKL-40在各组小鼠眼组织中的表达及定位。结果:脉络膜铺片及HE染色均证实激光造模成功,光凝后7 d和14 d均有CNV形成。在光凝后7 d组中,神经视网膜中YKL-40和VEGF的m RNA相对表达量明显升高[(1.939±0.209),(4.017±1.312)],与正常组[(1.002±0.076),(1.017±0.219)]相比差异均有统计学意义(t=13.320,P=0.006;t=5.457,P=0.012),而RPE/脉络膜复合体中YKL-40和VEGF表达[(0.968±0.381),(1.192±0.354)]较正常组[(1.004±0.101),(1.021±0.240)]无明显改变(t=-4.519,P=0.053;t=2.450,P=0.134);在光凝后14d组,神经视网膜和RPE/脉络膜复合体中YKL-40和VEGF的m RNA表达水平[(3.174±1.583),(3.045±1.430),(12.669±4.512),(8.254±2.968)]与正常组[(1.013±0.173),(1.043±0.371),(1.037±0.347),(1.078±0.462)]相比均明显升高,且差异具有统计学意义(t=4.777,P=0.041;t=3.508,P=0.039;t=4.827,P=0.040;t=12.800,P=0.006)。Pearson相关性分析提示在激光造模后YKL-40的表达与VEGF具有正相关性。免疫荧光发现YKL-40主要表达于光凝后小鼠视神经节细胞层、内丛状层和内核层,且光凝后7 d和14 d YKL-40表达[(0.141±0.004),(0.105±0.018)]与正常组(0.008±0.001)相比明显升高(F=106.388,P=0.000)。结论:YKL-40在CNV形成过程中表达上调,且与VEGF的表达具有正相关性,因此我们推断YKL-40可能在CNV形成这一病理过程中起着重要作用。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院