抗热毒宁注射液栀子蛋白单克隆抗体的研制与鉴定

作者：李芳; 周建明; 王红梅; 周军; 毕宇安; 王振中; 萧伟

来源：中国中药杂志, 2013, 38(10): 1606-1609.

• 热毒宁
• 蛋白
• 单克隆抗体
• 斑点酶联免疫吸附试验 Reduning injection
• protein
• monoclonal antibody
• Dot-ELISA

利用栀子脂溶性蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选获得1株抗栀子蛋白的单克隆抗体2H8。该单克隆抗体亚类鉴定为IgG2b,轻链为Kappa链。2H8腹水效价为1∶204 800。Western blot试验证实,2H8能与栀子蛋白反应,识别相对分子质量为58.5 kDa左右的特异性蛋白质条带。以2H8腹水作为一抗建立了斑点酶联免疫吸附试验方法(Dot-ELISA),最小检出量为19.5 ng。本研究为快速检测热毒宁注射液蛋白的试剂盒的研制奠定了基础。

• 单位
  中药制药过程新技术国家重点实验室; 江苏康缘药业股份有限公司