非洲猪瘟EP364R蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

作者：卢丽飞; 党佳佳; 吴青萍; 邹延林; 奚媖牡; 耿鑫梅; 黄伟坚

来源：中国动物传染病学报, 2021, 1-13.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20210615.004

• 非洲猪瘟
• 间接ELISA
• EP364R
• 原核表达

本研究根据非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV） Georgia 2007/1毒株的EP364R基因序列（GenBank登录号：FR682468.1）合成EP364R基因序列，通过PCR技术扩增目的基因EP364R，并克隆到pET-32a（+）载体，成功构建了重组质粒pET-32a-EP364R，鉴定正确后将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中成功诱导表达，纯化后的重组蛋白利用SDS-PAGE、Western blot进行鉴定。以纯化的pET-32a-EP364R重组蛋白为诊断抗原，成功建立了检测ASFV的间接ELISA抗体检测方法。将建立的间接ELISA检测方法与法国ID-Vet非洲猪瘟抗体试剂盒分别对临床84份血清进行检测，总符合率达89.3%，表明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。为ASFV的快速诊断、流行病学调查和血清学抗体检测提供了快速实用的检测手段。

• 单位
  广西大学