柱前衍生化法同时测定人凝血因子Ⅷ中甘氨酸和盐酸赖氨酸的含量

作者：姚佳佳; 闫晨

来源：药学实践杂志, 2018, 36(04): 362-384.

• 甘氨酸
• 盐酸赖氨酸
• 人凝血因子Ⅷ
• 柱前衍生化
• 高效液相色谱

目的建立一种柱前衍生-高效液相色谱法同时测定人凝血因子Ⅷ中2种氨基酸含量的方法。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生剂,采用C18色谱柱,流动相A为水,B为乙腈,C为含4mmol/L三乙胺的0.05mol/L醋酸钠缓冲液(pH=6.4),进行梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长360nm。结果甘氨酸的线性范围为2.9814.90g/L(r=0.999 9),盐酸赖氨酸线性范围为1.1955.975g/L(r=0.999 9),甘氨酸和盐酸赖氨酸的平均回收率分别为99.1%和98.2%。结论此方法检测结果准确,可用于人凝血因子Ⅷ中甘氨酸和盐酸赖氨酸的含量测定。