红肉苹果MdMKK9互作蛋白的筛选与鉴定

作者：孙晓红; 李欣欣; 王彦博; 陈奕州; 张玉刚^*

来源：山东农业科学, 2023, 55(02): 20-29.

DOI：10.14083/j.issn.1001-4942.2023.02.003

• 红肉苹果
• MdMKK9
• 酵母双杂交
• 双分子荧光互补
• 互作蛋白

MKK9是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族重要成员之一，是在植物细胞响应外界胁迫信号转导中发挥重要作用的酶。为深入研究苹果MKK9的相关功能，以红肉苹果‘黛红’为材料，克隆到MdMKK9基因CDS序列，利用酵母双杂交试验筛选苹果cDNA文库，并通过酵母双杂交筛选、体内双分子荧光互补(BiFC)和体外Pull-down试验进行MdMKK9互作蛋白验证。结果表明，通过对苹果cDNA文库的筛选，共获得11个参与调控植物生长发育及应答逆境胁迫的候选互作蛋白；选取花青苷合成相关蛋白MdCHS及氮胁迫调控相关蛋白MdSPX3进行酵母双杂交、体内BiFC及体外Pull-down试验，结果证明MdMKK9可与MdSPX3互作。

• 单位
  青岛农业大学; 生命科学学院