沉默lncRNA DANCR调节尼古丁胁迫下NSCLCs的炎症微环境、增殖活性和迁移

作者：兰飞; 赵鹏; 刘冬^*

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(11): 1485-1491.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.11.001

• 非小细胞肺癌细胞
• 炎症微环境
• NF-κB炎症通路
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 长链非编码RNA DANCR

目的探讨促癌基因lncRNA DANCR在尼古丁诱导的肿瘤微环境下对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移的作用。方法分别使用不同浓度尼古丁(0,50,250,500 ng/ml)刺激NSCLC细胞系A549,采用ELISA法检测四组细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平变化。选择500 ng/ml尼古丁刺激A549细胞,RT-qPCR法检测两组细胞(0 ng/ml组、500 ng/ml组) IKKβ水平变化,Western blot法检测该两组细胞p-IκBα及胞核p65-NF-κB水平变化。A549细胞中的lncRNA DANCR以siRNA法进行沉默。以尼古丁(0 ng/ml、500 ng/ml)及DANCR沉默(未处理、si-NC转染、si-DANCR转染)联合处理细胞,分为0 ng/ml组、0 ng/ml+si-RNA组、0 ng/ml+si-DANCR组、500 ng/ml组、500 ng/ml+si-NC组和500 ng/ml+si-DANCR组,使用ELISA法复测TNF-α、IL-6、IL-8的水平变化,Western blot法复测胞核p65-NF-κB水平变化,MTT法检测各组A549细胞的增殖活性变化,细胞划痕实验评估各组A549细胞的迁移能力变化。结果尼古丁能够以剂量依赖性方式(50,250,500 ng/ml)诱导A549细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平增加(P <0. 05)。此外,与0 ng/ml尼古丁组相比,A549细胞炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8水平,NF-κB炎性反应信号通路相关分子IKKβ、p-IκBα、p65-NF-κB水平,细胞增殖活性及划痕愈合能力在500ng/ml尼古丁组均显著增加(均P <0. 05),而这种增加在500 ng/ml+si-DANCR组中均被显著抑制(均P <0. 05)。结论沉默lncRNA DANCR调节尼古丁胁迫下NSCLC细胞的炎症微环境、增殖活性和迁移能力。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学