基质重塑相关7(MXRA7)对SHI-1白血病细胞系生物学功能的影响

作者：郑宇丹; 孙振江; 马鲲鹏; 王宜强; 林丹丹^*

来源：中国实验血液学杂志, 2022, 30(03): 688-694.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022.03.005

• MXRA7
• 急性髓系白血病
• 细胞凋亡
• BCL-2

目的:构建过表达人全长基质重塑相关7(MXRA7)的SHI-1急性髓系白血病稳转细胞系，检测MXRA7对SHI-1细胞生物学功能的影响。方法:合成人MXRA7全长的cDNA序列，并连接到慢病毒穿梭载体pRRL-Venus中，使用293T细胞包装产生慢病毒，感染人白血病细胞系SHI-1,应用流式细胞术分选YFP+细胞，扩大培养获得稳转细胞系。通过Real-time qPCR、Western blot及激光共聚焦技术验证MXRA7在SHI-1细胞中的表达及分布。采用流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期，采用Annexin V和7-AAD染色流式检测细胞凋亡，采用Western blot技术检测与细胞凋亡相关蛋白的表达情况。结果:成功构建了过表达MXRA7的SHI-1稳转细胞系，激光共聚焦证明MXRA7表达于SHI-1细胞的胞浆中；与对照细胞相比，过表达MXRA7不会影响细胞增殖和细胞周期，但会降低甲氨蝶呤诱导的凋亡细胞的百分比，促进凋亡抑制蛋白BCL-2的表达。结论:成功构建了过表达MXRA7的SHI-1稳转细胞系，MXRA7通过促进BCL-2的表达来抑制药物诱导的细胞凋亡。

• 单位
  苏州大学附属第一医院; 苏州大学