局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸蛋白酶-3和其激活的DNA酶与神经元损伤的关系及半胱氨酸蛋白酶-3抑制剂的保护作用

作者：杨春晓; 金永华; 刘玮; 蔡文进; 梁庆成; 朱丹

来源：中华神经科杂志, 2009, (08): 546-550.

• 脑缺血
• 再灌注
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
• 脱氧核糖核酸酶类
• 寡肽类
• 细胞凋亡

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)及由半胱氨酸蛋白酶激活的 DNA 酶(caspase-activated deoxyribonuclease,CAD)的表达变化与神经元损伤的关系,研究 caspase-3特异性抑制剂 Ac-DEVD-CHO 对缺血神经元的保护作用。方法实验设干预组和模型组,线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞1 h 后再通模型,干预组于侧脑室给予 Ac-DEVD-CHO,模型组给予二甲基亚砜(DMSO)。应用 HE、免疫组织化学、TUNEL 染色及电镜观察大鼠大脑中动脉栓塞1 h后再灌注6、12、24、48、72 h 时 caspase-3和 CAD 蛋白的表达及神经元损伤程度的变化。结果 HE 染色和电镜观察下,模型组和干预组差异不明显;TUNEL 染色阳性细胞数除6 h 外,两组间其余时间点相比差异具有统计学意义;模型组和干预组 caspase-3蛋白表达24 h 达高峰,分别为2.360±0.318与0.804±0.206(t’=10.039,P<0.01),12～48 h 与模型组同期相比差异均有统计学意义;模型组和干预组 CAD 蛋白表达于48 h 达高峰,分别为3.061±0.567与0.812±0.240(t’=8.960,P<0.01),12～72 h 与模型组同期相比差异均有统计学意义。结论 caspase-3-CAD-DNA 降解途径是鼠脑缺血再灌注神经元损伤的重要途径,caspase-3抑制剂具有一定程度的神经保护作用。

• 单位
  神经内科; 哈尔滨医科大学附属第二医院