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摘要
目的研究核因子E2相关因子2（NuclearE2-relatedfactor2，Nrf2）靶点及线粒体质量控制系统调控姜三七挥发油（essentialoilfromStahlianthusinvolucratusrhizomes，EOSIR）对人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs）损伤的保护作用机制。方法用氧化低密度脂蛋白（oxidizedlow-densitylipoprotein，ox-LDL）诱导HUVECs建立细胞损伤模型，siRNA转染沉默Nrf2因子的表达，将培养好的细胞分为对照组、模型组、EOSIR组、转染组、转染阴性对照组，利用Westernblot及qRT-PCR检测Nrf2及其下游因子的蛋白及mRNA的表达；Griess法检测一氧化氮（nitricoxide，NO）含量；ELISA法分析人内皮素（Endothelin1，ET-1）、人前列环素（Prostacyclin，PGI2）的含量；线粒体质量检测实验中将细胞分为对照组、模型组、低剂量EOSIR组、中剂量EOSIR组、高剂量EOSIR组、阿司匹林阳性对照组，透射电镜观察HUVECs线粒体形态；Westernblot检测线粒体融合蛋白1（mitofusin1，Mfn1）、线粒体融合蛋白2（mitofusin1，Mfn2）、线粒体动力相关蛋白（dynamin-relatedprotein1，Drp1）、线粒体内膜融合蛋白（OpticAtrophy1，Opa1）、线粒体转录因子A（mitochondrialtranscriptionfactorA，TFAM）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（peroxisomeproliferatoractivatedreceptorγcoactivator-1α，PGC-1α）及轻链3A/B蛋白（LC3A/B）、泛素结合蛋白（P62）表达。结果 EOSIR组的Nrf2及其下游因子的表达水平、NO、PGI2的含量较模型组均显著升高，ET-1水平较模型组相比显著降低，转染沉默Nrf2后，EOSIR对上述指标的改善作用被抑制；透射电镜观察线粒体形态，EOSIR干预组自噬小体数量较模型组明显减少，线粒体形态恢复正常，同时，EOSIR组显著改善了ox-LDL引起的线粒体相关蛋白表达的变化（P＜0.05）。结论 EOSIR可能通过激活Nrf2靶点及调控线粒体质量控制系统发挥对ox-LDL诱导的内皮细胞损伤的保护作用，延缓动脉粥样硬化的进程。
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