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摘要
目的:探讨几种不同的小鼠核移植方案的优劣及造成此差异的原因和解决途径。方法:①取8-10周龄昆明鼠成熟卵胞质体作为受体,颗粒细胞作为核供体,比较含糖及不含糖操作液对去核过程的影响;②透明带打孔法、透明带膨胀法和挤压法去核,对卵胞质体质量的影响;③比较直接注核和电融合得到的重构卵激活后出现类原核的数目及克隆胚胎发育的情况。结果:在2种操作液中的去核效率并无差异,但操作≥10min时在含糖操作液中的去核死亡率高于不含糖操作液组(P<0.05);在3种去核方法中,透明带打孔法的单个卵子平均去核所需时间较其他2种方法长(P<0.05),挤压法的单个卵子平均去除胞质比例较其他2种方法高(P<0.05);在注核方法中,使用直接注核法较电融合法导致注核后重构胚的死亡率高(P<0.05),激活后出现2个及以上类原核的比例高(P<0.05),但克隆胚胎发育情况优于电融合组(P<0.05)。结论:使用含糖操作液显核清晰,但应尽量缩短操作时间;透明带膨胀法是3种方法中对卵子胞质影响最小的方法;直接注核较电融合法对卵子的激活作用小,克隆胚胎发育更好。
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