迷迭香酸通过激活Nrf2/HO-1通路对Aβ1-42所致星形胶质细胞损伤的保护作用

作者：张亚苹; 隋海娟; 闫恩志^*

来源：吉林大学学报(医学版), 2023, 49(01): 22-30.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20230104

• 迷迭香酸
• 星形胶质细胞
• β淀粉样蛋白
• 核因子E2相关因子2
• 血红素加氧酶1

目的：探讨迷迭香酸(RA)对β淀粉样蛋白1-42 (Aβ1-42)引起的星形胶质细胞损伤的保护作用及炎症因子释放的抑制作用，并阐明其相关机制。方法：原代培养星形胶质细胞，将细胞分为对照组，Aβ1-42组(5μmol·L-1)，不同浓度(20,50和100μmol·L-1) RA+Aβ1-42组，核因子E2相关因子2 (Nrf2)抑制剂(ML385)组，ML385+RA+Aβ1-42组。星形胶质细胞以不同浓度(20、50和100μmol·L-1) RA预处理24 h，再给予终浓度5μmol·L-1Aβ1-42处理24 h,ML385组在加入RA前先加入终浓度10μmol·L-1 ML385预处理6 h。MTT法检测各组细胞活性，乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞LDH释放率，酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测各组细胞中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平，Griess法检测各组细胞培养液中一氧化氮(NO)水平，免疫荧光法检测各组细胞中胶质原纤维酸蛋白(GFAP)和Nrf2表达情况，Western blotting法检测各组细胞中GFAP、Nrf2、血红素加氧酶1 (HO-1)蛋白表达水平。结果：与对照组比较，Aβ1-42组细胞活性明显降低(P<0.01), LDH释放率及细胞中IL-1β、 TNF-α和NO水平明显升高(P<0.01),GFAP荧光强度明显增强，Nrf2荧光强度明显减弱，细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)；与Aβ1-42组比较，不同浓度RA+Aβ1-42组细胞活性明显升高(P<0.05或P<0.01),LDH释放率及细胞中IL-1β、TNF-α和NO水平明显降低(P<0.01),GFAP荧光强度明显减弱，Nrf2荧光强度明显增强，细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)；与RA (50μmol·L-1)+Aβ1-42组比较，ML385+RA+Aβ1-42组细胞活性明显降低(P<0.01),LDH释放率及细胞中IL-1β、TNF-α和NO水平明显升高(P<0.01),GFAP荧光强度明显增强，Nrf2荧光强度明显减弱，细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Nrf2和HO-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论：RA对Aβ1-42诱导的星形胶质细胞炎症因子和NO释放有抑制作用，使星形胶质细胞免受损伤，该保护作用可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

• 单位
  基础医学院; 锦州医科大学