携带人6Ckine/IFNγ融合基因腺病毒载体的构建和鉴定

作者：薛刚; 程莹; 曹永宽; 刘然义; 田伏洲; 黄文林

来源：中国生物制品学杂志, 2008, (04): 261-264.

• 次级淋巴组织趋化因子
• &gamma
• -干扰素
• 融合基因
• 腺病毒载体 Secondary lymphoid organ chemokine
• Interferon &gamma
• Fusion gene
• Adenovirus vector

目的构建携带人次级淋巴组织趋化因子(6Ckine)和γ-干扰素(IFNγ)融合基因的重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,并在真核细胞中表达。方法RT-PCR法分别从人淋巴结和外周血单个核细胞中扩增人6Ckine cDNA和IFNγ cDNA,分两步先后将6Ckine cDNA和IFNγ cDNA连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,二者之间以XbaⅠ酶切位点相连,应用AdMax腺病毒包装系统在HEK293细胞内同源重组,构建重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,经扩增和纯化后感染真核细胞HepG2,并检测6Ckine/IFNγ融合蛋白的表达。结果所构建的重组腺病毒Ad-6Ckine...

• 单位
  中国人民解放军成都军区总医院; 中山大学肿瘤防治中心