摘要
遗传转化技术是研究基因功能的重要方法,然而高粱中遗传转化体系尚不成熟,病毒介导的基因沉默体系(VIGS)将为研究高粱基因功能提供一条便利可行的途径。本研究以狗尾草花叶病毒(FoMV)为基础,以高粱品种BTx623为研究材料,利用FoMV-sg载体沉默八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因,构建病毒诱导的基因沉默体系。注射烟草14 d后病毒扩增良好,将烟草叶片研磨并涂抹二叶期高粱幼苗,涂抹28 d后,FoMV-sg-PDS组出现明显白化表型;提取叶片RNA,利用RT-PCR的方法进行SbPDS基因沉默效果检验,结果表明,与对照(Mock)和空载(FoMV-sg)相比,FoMV-sg-PDS组中SbPDS基因条带明显变弱,发生了沉默反应。本研究初步构建了高粱中病毒介导的基因沉默体系,可用于高粱相关基因的功能研究。
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