千金子制霜前后提取物对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响研究

作者：王慧楠; 姜明瑞; 王志成; 岳珠珠; 魏晓彤; 王梦琳; 石双慧; 张婧秋; 陈梦雨; 刘芊芊; 王英姿^*

来源：北京中医药大学学报, 2023, 46(06): 780-789.

• 千金子
• 制霜减毒
• TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路
• 炎性反应
• 小鼠

目的 研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异。方法 42只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组，千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg)和千金子霜品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg),每组6只，连续灌胃7 d。酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量，蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达。30只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组、千金子生品组、千金子生品+TAK-242组、千金子霜品组、千金子霜品+TAK-242组，每组6只。各给药组灌胃相应药液(20.98 g/kg),连续7 d,千金子生品+TAK-242组和千金子霜品+TAK-242组于给药第1、5、6、7天给药前30 min腹腔注射TAK-242溶液(3 mg/kg)。采用蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织NLRP3、NF-κB p65蛋白表达，以及NLRP3、IL-1β mRNA表达。结果 千金子生品可导致IL-1β和TNF-α大量释放，上调TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01),千金子制霜后对IL-1β、TNF-α分泌，以及TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达的促进作用减弱(P<0.05,P<0.01)。加入TLR4的阻断剂TAK-242后，可抑制NLRP3、NF-κB p65蛋白表达，以及NLRP3、IL-1β mRNA表达(P<0.01)。结论 千金子生品可能通过激活TLR4介导的NF-κB/NLRP3通路，促进TNF-α和IL-1β释放，诱导结肠组织产生炎性反应，而制霜后对TLR4/NF-κB/NLRP3通路传导及促炎因子分泌的上调作用明显减弱，提示其制霜减毒的作用机制可能与致炎能力下降及干预TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路有关。

• 单位
  北京中医药大学