摘要
目的 探究投射到纹状体(Str)的黑质致密部(SNpc)多巴胺(DA)能神经元的上游脑区。方法 采用逆向病毒示踪技术逆向追踪SNpc-Str环路的上游脑区。应用立体定位技术在8周龄C57BL/6雄性小鼠Str区注射逆行追踪病毒rAAV-hsyn-cre-wpre-pA(retro);同时在SNpc注射病毒AAV-DIO-EF1α-GFP-TVA和AAV-DIO-EF1α-RVG(1∶2混合);3周后在SNpc注射逆行跨突触狂犬病毒RV-Enva-ΔG-dsRed。1周后取脑进行冷冻切片,应用Olympus VS120荧光显微镜观察表达dsRed阳性细胞的脑区。结果 应用荧光显微镜在SNpc可以观察到GFP(绿色)和dsRed(红色)阳性细胞,证明依赖Cre重组酶表达的AAV-DIO-EF1α-GFP-TVA病毒以及依赖TVA元件表达的狂犬病毒均在SNpc正常表达。同时在外侧下丘脑(LH)、前连合后肢间质核(IPAC)脑区观察到dsRed(红色)阳性细胞。结论 LH和IPAC脑区可能是SNpc-Str环路DA能神经元的上游脑区。
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单位青岛大学; 基础医学院