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摘要
目的:构建microR-185-5p (miR-185-5p)的过表达载体并研究miR-185-5p对人胰腺癌Panc-1细胞体外增殖的影响。方法:将人工合成的miR-185-5p寡聚核苷酸与经EcoR I和HindⅢ双酶切连接上纯化后的真核表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR,接着转化进E.Coli Top10,再经过DNA测序、比对检测进行验证;将构建成功的载体转染进Panc-1细胞中,用倒置荧光显微镜和qRT-PCR方法验证转染效率,用CCK8方法检测miR-185-5p对Panc-1细胞增殖的影响。结果:成功构建了miR-185-5p真核表达载体;构建好的载体瞬时转染Panc-1细胞后发现miR-185-5p的表达显著增加,并且能够抑制Panc-1细胞的体外增殖能力。结论:miR-185-5p的真核表达载体构建成功,同时证明了miR-185-5p过表达可抑制人胰腺癌细胞Panc-1的增殖。
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