二穗短柄草BdGPX4基因的克隆及酶学性质

作者：杨雪; 武志海; 李艳丽; 杨美英

来源：中国农业大学学报, 2018, 23(10): 8-17.

DOI：10.11841/j.issn.1007-4333.2018.10.02

• 二穗短柄草
• 谷胱甘肽过氧化物酶
• 表达
• 酶学活性

为解析模式植物二穗短柄草中谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GPX）在抗氧化过程中的作用机制,对二穗短柄草BdGPX4基因进行克隆,获得681bp的cDNA序列,该基因编码226个氨基酸残基的蛋白质,预测相对分子量是24.49ku。通过亚细胞定位预测,BdGPX4蛋白位于叶绿体和线粒体中。生物信息学分析发现BdGPX4基因启动子具有植物激素、光信号、干旱以及冷胁迫响应元件。结合二穗短柄草基因芯片数据和RT-PCR表达检测结果,发现BdGPX4基因在根、茎、叶、叶鞘、苗芽、穗状花序和种子等部位均表达,在光合组织和生长旺盛部位的表达显著高于非光合和衰老部位,并在根部受到SA诱导表达上调。成功构建BdGPX4基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化BdGPX4蛋白,检测到对H2O2和COOH具有较高活性,但对底物tBOOH活性较低,与直系同源蛋白OsGPX4相比功能发生分化。基因表达模式及酶学活性的特点预示着二穗短柄草BdGPX4基因在光合器官和胁迫条件下具有重要的抗氧化作用。

• 单位
  吉林农业大学; 生命科学学院