大肠杆菌yigP基因启动子的定位

作者：李雅蓉; 陈志超; 汪屹; 叶江; 张惠展

来源：华东理工大学学报, 2012, (02): 165-169+258.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2012.02.002

• 大肠杆菌
• yigP基因
• 转录独立性
• 启动子探针质粒
• 启动子定位 Escherichia coli
• yigP gene
• transcription independence
• promoter probe plasmid
• promoter positioning

在已知大肠杆菌yigP基因的最小功能片段为yigP-P4P2基础上,将该片段装载于无外源启动子的载体质粒上,通过功能回补yigP基因缺陷株JDP14,发现其可以代替温敏质粒,保证大肠杆菌正常生长,推断其包含完整转录单元。RT-PCR结果显示该片段内部有转录产物,即yigP-P4P2片段具有转录独立性。将不同长度的yigP-P4P2亚片段克隆到启动子探针质粒pSP-Z上,通过对重组菌进行蓝白斑筛选及β-半乳糖苷酶活性测定,结果显示pP40V3-Z/JM83和pP40V4-Z/JM83可观测到蓝色菌斑,并检测到较弱的β-半乳糖苷酶活性,由此表明大肠杆菌yigP基因启动子位于该片段上游,下游边界位于...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学