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摘要
目前抗血管新生已经成为一种有效的癌症治疗手段。内皮抑素(Endostatin)可以抑制血管新生和形成,已经作为抑癌药物上市并作为辅助用药已起到较好的治疗效果。课题组构建了将内皮抑素与穿膜肽九聚精氨酸融合的内皮抑素变体,拟促进内皮抑素进入细胞膜以期达到更好的治疗效果。该研究以原核表达质粒p BV222为载体,构建了带有His标签的内皮抑素变体(9R-Endo-9R),内皮抑素变体蛋白的相对分子质量约21 k。在1 L的发酵体系下,蛋白以包涵体形式表达,为了深入探究该内皮抑素变体的生物学性能,该研究探索以变复性的方法获得可溶性内皮抑素变体,并对纯化方法进行优化以获得较高回收率。CCK-8实验结果表明该内皮抑素变体对血管内皮细胞具有增殖抑制作用,显示优化后的复性和纯化的内皮抑素变体具有较好的生物学活性。该研究为内皮抑素变体的进一步药学性质的研究奠定了基础。
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