摘要
目的:检测人白细胞介素17A (IL-17A)重组蛋白在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:收集胃癌患者术后石蜡标本30例、肠上皮化生标本20例和正常胃组织标本10例。免疫组织化学染色法检测各种组织中IL-17A和白细胞介素17受体A (IL-17RA)的阳性表达率,Pearson相关分析法分析IL-17A与IL-17RA表达的相关性。将对数生长期BGC-823细胞分为对照组和不同浓度(50、100和200μg·L-1) IL-17A组。MTT法检测各组胃癌BGC-823细胞增殖活性,流式细胞术检测各组胃癌BGC-823细胞凋亡率,Transwell实验检测各组胃癌BGC-823细胞侵袭细胞数,划痕实验检测各组胃癌BGC-823细胞迁移率,Western blotting法检测各组胃癌BGC-823细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果:肠上皮化生和胃癌组织中IL-17A和IL-17RA阳性表达率明显高于正常胃组织(P<0.01),胃癌组织中IL-17A与IL-17RA表达呈正相关关系(r=0.891,P<0.01)。IL-17A作用48和72 h后,与对照组比较,100和200μg·L-1IL-17A组胃癌BGC-823细胞增殖活性升高(P<0.05)。与对照组比较,100和200μg·L-1IL-17A组胃癌BGC-823细胞凋亡率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数和细胞迁移率升高(P<0.05);Western blotting法检测,与对照组比较,200μg·L-1IL-17A组胃癌BGC-823细胞中VEGF、MMP-9和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:重组人IL-17A可促进胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,其作用机制可能与促进侵袭相关蛋白VEGF和MMP-9表达以及抑制凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达有关。
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单位基础医学院; 北华大学附属医院; 吉化集团公司总医院; 北华大学