磷硫代siRNA的YAP基因沉默活性研究

作者：唐硕; 黄震^*

来源：四川大学学报(自然科学版), 2021, 58(05): 159-164.

DOI：10.19907/j.0490-6756.2021.056004

• 核酸硫代磷酸酯修饰
• 酶促合成PS-siRNA
• T7 RNA聚合酶体外转录
• 非对映体纯
• YAP基因表达
• RNA干扰功效

为了探究RNA聚合酶酶促合成非对映体纯PS-siRNA(pPS-siRNA)的基因沉默活性,本研究针对潜在的癌症治疗靶点Yes相关蛋白(YAP),通过qPCR、Western blot等方法研究了其对YAP基因的沉默效果和对HeLa细胞的细胞毒性.结果表明,与未修饰的siRNA(PO-siRNA)相比,pPS-siRNA可以更好地下调YAP基因表达(效率提高约30%),而没有明显的细胞毒性.此外,MTT细胞增殖实验与流式细胞术的结果表明,经pPS-siRNA敲降YAP后,HeLa细胞的增殖受到了抑制.说明pPS-siRNA在基因治疗方面具有优越性以及YAP作为肿瘤治疗靶点的潜力.

• 单位
  生命科学学院; 生物资源与生态环境教育部重点实验室; 四川大学