环状RNA DLG1在肝细胞癌生物学中的作用

作者：王谦; 余伟; 王涛; 黄长山; 黄涛^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(09).

• 肝细胞癌
• 增殖
• 葡萄糖代谢
• 索拉非尼

目的探索环状RNA circDLG1在肝细胞癌(HCC)生物学进程中的作用。方法通过利用公共数据库分析circDLG1在肝细胞癌肿瘤组织及正常组织的表达水平, 并利用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)在细胞水平进行验证, qRT-PCR验证短发卡RNA(shRNA)转染效率, 平板克隆实验分析circDLG1对HCC细胞增殖活力的影响。利用蛋白质印迹法(Western blot)和qRT-PCR检测circDLG1对HCC糖代谢相关葡萄糖的摄取、消耗、乳酸的产生和对索拉非尼耐药的影响。采用t检验或单因素方差分析组间差异。结果 GSE97332公共数据库分析表明circDLG1在肿瘤组织中的表达高于正常组织组(8.632±0.861比4.833±0.357, t=6.482, P<0.05)。qRT-PCR结果表明circDLG1在肝细胞癌(SK-Hep-1、Huh7、HepG2、HepG3B和BEL7404组)中的表达量高于HCC空白对照组(3.358±0.325、8.297±0.557、5.624±0.571、4.028±0.534、6.488±0.386比1.566±0.136, t=6.228、8.372、7.864、6.486、6.318、7.571, P<0.05, P<0.01)。qRT-PCR验证转染shRNA可以使circRNA DLG1在HCC细胞中的表达水平低于HCC空白对照组(Hep3B:0.324±0.028、0.487±0.034比1.155±0.244, t=11.287、9.661, P<0.01;Huh7:0.283±0.016、0.425±0.024比1.117±0.486, t=11.498、10.087, P<0.01), 平板克隆实验和生物化学实验结果表明敲低circRNA DLG1导致HCC细胞增殖低于HCC空白对照组(Hep3B:72.300±8.400、76.800±6.200比152.300±8.200, t=10.287、9.053, P<0.01;Huh7:46.500±4.100、52.500±7.800比173.800±9.600, t=20.384、16.343, P<0.01)、葡萄糖的摄取低于HCC空白对照组(Hep3B:138.942±10.133比98.323±7.922、68.669±7.924比109.355±7.654, t=12.035、14.546, P<0.01;Huh7:125.671±6.772比105.372±6.338、50.379±6.114比99.364±6.449, t=7.286、16.825, P<0.01)、细胞外酸化率低于HCC空白对照组(Hep3B:41.261±5.338比73.615±8.933, t=8.068, P<0.01;Huh7:44.871±8.245比69.348±9.742, t=10.323, P<0.01)及乳酸的产生低于HCC空白对照组(Hep3B:138.664±8.669比98.637±9.774、60.258±7.864比100.236±6.883, t=16.825、7.286, P<0.01;Huh7:142.928±8.17比106.775±5.933、82.189±7.549比104.775±6.746, t=18.148、6.972, P<0.01)以及对索拉非尼的耐药性低于HCC空白对照组(Hep3B:26.458±7.146比49.324±2.690, t=6.065, P<0.05;Huh7:32.651±3.228比52.374±6.270, t=6.828, P<0.05)。结论 circDLG1可以促进肝细胞癌细胞的增殖、糖酵解及对索拉非尼的耐药性

• 单位
  河南省肿瘤医院; 郑州大学