梅花鹿Fibulin 5编码区cDNA的克隆及功能研究

作者：褚文辉; 王权威; 王玉俗; 王桂武; 李春义^*

来源：兽类学报, 2019, 39(02): 172-181.

DOI：10.16829/j.slxb.150232

• 梅花鹿
• 鹿茸
• FBLN5
• 生物信息学分析
• 干扰
• 血管生成

为研究梅花鹿扣针蛋白5(Fibulin 5, FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN 5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析。同时利用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区(Potentiated pedicle periosteum, PPP)细胞中FBLN5基因表达,并研究了基因表达下调后PPP细胞条件培养液对HUVEC细胞增殖的影响。结果显示:(1)梅花鹿FBLN5 cDNA编码区长1 347 bp,编码448个氨基酸;(2)生物信息学软件分析显示,梅花鹿FBLN5蛋白含有一个跨膜区,一段23个氨基酸的信号肽序列,vWAMatrilin、cEGF和EGFCA等重要的功能结构域;(3)构建了梅花鹿FBLN5基因的RNAi重组质粒并获得了一条能有效下调目的基因效率达88.72%的靶序列pLVTHM-FBLN2,MTT结果显示PPP细胞FBLN5基因表达量下调后,所获细胞条件培养液可显著促HUVEC细胞增殖,推测FBLN5可能参与了鹿茸再生过程中的血管生成及稳态维持等过程。

• 单位
  吉林农业大学; 长春科技学院; 中国农业科学院特产研究所; 台州学院; 生命科学学院; 分子生物学国家重点实验室