采用核转染技术建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G_1的真核细胞系

作者：曾梦华; 房崇芸; 王树森; 朱珉; 谢林; 王璐; 李荣; 吴雄文; 陈实

来源：中国修复重建外科杂志, 2006, (11): 1130-1133.

• 可溶性人类白细胞抗原G1
• 核转染
• 真核细胞系

目的建立稳定表达可溶性人类白细胞抗原G1(solublehumanleucocyteantigenG1,sHLA-G1)的真核细胞系。方法采用核转染技术将质粒pcDNA3-sHLA-G1转入不表达HLA-类分子的LCL721.221细胞,经G418筛选获得稳定转染细胞,通过RT-PCR及Dot-ELISA在基因和蛋白水平鉴定目的基因的表达。结果采用核转染法LCL721.221细胞转染效率可以达到约14%。RT-PCR检测发现了sHLA-G1基因特异性条带;采用Dot-ELISA方法利用sHLA-G1特异性抗体MEM-G/9检测,存在sHLA-G1蛋白。结论通过核转染方法成功建立了稳定表达sHLA-G1的真核细胞系。

• 单位
  华中科技大学; 华中科技大学同济医学院附属同济医院