蚊虫RNAi显微注射方法的建立

作者：吴群; 李春晓; 廖承红; 韩谦; 赵彤言

来源：寄生虫与医学昆虫学报, 2015, 22(04): 233-237.

• 微量注射
• 致倦库蚊
• 成蚊

本文构建了蚊虫显微注射方法。以致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus成蚊为注射对象,从不同麻醉方法对蚊虫进行固定、注射蚊虫身体不同部位、注射剂量等方面进行优化来构建最佳显微注射方案。结果显示蚊虫冰冻（-30℃）4、5、7、10 min后蚊虫成活率分别为98.97%、89.63%、83.50%、79.87%,4 min麻醉效果最佳;对蚊虫充CO2气体持续0.5、1、2、4 min后蚊虫成活率均为100%;注射剂量为0.7～0.8μL时可以明显看出蚊虫腹部变大;正对胸部腹面注射蚊虫的成活率67.81%,低于从胸部侧面注射成活率93.85%。结果表明选取羽化3～5 d并断糖水4 h蚊虫于-30℃冰冻4 min后放置于冰盒上,利用微量注射器从蚊虫胸部侧面注入0.7～0.8μL ds RNA溶液是最佳的注射方法。。

• 单位
  海南大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院