大麦黄矮病毒GPV株系ORF4基因在大肠杆菌中的表达及特异抗血清的制备

作者：李永丽; 吴茂森; 王振跃; 张文蔚; 成卓敏

来源：植物病理学报, 2004, (04): 352-355.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.2004.04.011

• 大麦黄矮病毒GPV
• 原核表达
• 抗血清 Barley yellow dwarf virus GPV
• prokaryotic expression
• antiserum

根据已报道的大麦黄矮病毒GPV株系 (BYDV GPV)相关基因序列设计合成引物 ,利用RT PCR方法获得ORF4基因 ,并将其克隆到原核表达载体 pET 5a中。经IPTG诱导、SDS PAGE分析 ,结果表明 :ORF4基因在大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中获得了高效表达 ,分子量为 17kDa。以回收的表达产物为抗原免疫家兔 ,制备了BYDV GPV 17kDa蛋白的特异性抗血清。Westernblot检测结果 ,制备的抗血清可用于检测BYDV GPV侵染后在燕麦体内表达的 17kDa蛋白