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摘要
目的:探究肿瘤来源的Ig G是否对T细胞活化具有抑制作用。方法:首先从卵巢癌肿瘤组织纯化了肿瘤来源的Ig G(tumor derived Ig G,t Ig G),并从脐带血中分离出单个核细胞(cord blood mononuclear cells,CBMC)及淋巴细胞(cord blood lymphocyte,CBL),用植物血球凝集素(phytohaemagg lutinin,PHA)刺激单个核细胞和淋巴细胞,使单个核细胞与淋巴细胞处于增殖状态,用荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl amino ester,CFSE)染色,CFSE对细胞无毒性,可以穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白结合,其荧光强度会随着细胞的分裂增殖而逐级递减,从而可以检测细胞增殖的情况。把从卵巢癌肿瘤组织中纯化得到的t Ig G分为1 mg/L、10 mg/L和100 mg/L组,分别加入到单个核细胞和淋巴细胞中,静脉注射用免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)作为阳性对照,也分为1 mg/L、10 mg/L和100 mg/L组,磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)作为阴性对照,用细胞流式术检测CD4+及CD8+T细胞的增殖能力,并分别在64 h和86 h两个时间点检测细胞的增殖情况。结果:在CBMC体系中加入的t Ig G可以明显地抑制CBMC中T细胞的增殖,发挥免疫抑制作用;同样,在CBL体系中加入的t Ig G对T细胞也有抑制作用,且加入t Ig G刺激的T细胞比加入IVIG刺激的T细胞的抑制增殖作用更强;在CBL体系中,t Ig G的1 mg/L组和10 mg/L组对T细胞发挥的抑制增殖作用比100 mg/L组弱。结论:t Ig G可以抑制T细胞的增殖,促使肿瘤发挥肿瘤免疫逃逸效应。
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