摘要
目的制备重组精囊蛋白(semenogelin,Sg),研究其对精子活动的影响。方法设计特异性的引物,用分子克隆技术从精囊cDNA文库中扩增精囊蛋白Sg,再将DNA插入质粒载体PET100,筛选序列正确的阳性克隆,转染BL21(DE3)大肠埃希菌,诱导表达重组人类Sg蛋白,用500g/L Ni-NTA纯化重组蛋白,用正常人的通过上游法筛选出的活动精子行抑制分析,研究重组Sg在4种不同浓度0,1ng/μL、5ng/μL、10ng/μL下对精子活动的影响。结果重组Sg在5ng/μL、10ng/μL浓度下明显抑制精子的运动(P<0.001)。结论Sg分子明显抑制精子运动,精液液化过程中,必须清除Sg中具有抑制功能的片段,精子才能前向运动。
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单位南京医科大学第一附属医院