检测产志贺毒素大肠杆菌抗体的间接ELISA试剂盒的研制

作者：张雪寒; 张强; 张碧成; 汪伟; 倪艳秀; 温立斌; 李彬; 周俊明; 何孔旺; 周萍

来源：西南农业学报, 2016, (11): 2738-2745.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2016.11.042

• 致病性大肠杆菌
• 紧密素
• 间接ELISA Shiga toxigenic Escherichia coli
• Intimin
• Indirect ELISA
• Bovine
• Goat

本研究旨在研制一种以紧密素为检测靶标的间接ELISA技术,检测血清中产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxigenic Escherichia coli,STEC)的抗体水平。根据紧密素27个亚型的N端保守序列,体外表达390~543 aa片段制备包被抗原,通过敏感性、特异性、重复性和稳定性实验,建立检测STEC的抗体的间接EIISA方法。经优化筛选的间接ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度3 ng/孔,待检血清稀释比例1∶200,HRP-兔抗羊Ig G、HRP-兔抗牛Ig G的工作浓度均为1∶15000,5%脱脂奶封闭l h,底物作用时间10min,用于牛、羊疫苗抗体检测或者STEC大肠杆菌...

• 单位
  江苏省农业科学院; 农业部