微流控LAMP芯片构建及在MRSA快速检测中的应用研究

作者：管潇; 张梦军; 韩清娟; 冯志强; 曹文轩; 刘明; 郭嘉伟; 张惠静

来源：中国测试, 2015, 41(04): 50-54.

• 微流控芯片
• 环介导等温扩增
• 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
• mec A基因
• 快速检测

构建一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),集细菌在线裂解、核酸提取、目标基因扩增和产物检测一体化的用于病原菌快速检测的集成式微流控芯片。以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus,MRSA)为模式菌,以mec A为靶基因,在优化条件下用芯片实现对病原菌的在线检测,完成对101106cfu MRSA的在线裂解、LAMP扩增和产物测定,采用荧光原位检测可得101105cfu的检测范围和101cfu的检出限。该微流控LAMP芯片结构简单,操作便捷,可在1 h内实现对MRSA mec A基因的快速检测,具有较高的灵敏度和特异性,为下一步临床生物样本病原菌快速检测微流控芯片系统的构建奠定前期研究基础。

• 单位
  第三军医大学