姜黄素通过调控MicroRNA-1246激活P53蛋白对膀胱癌T24细胞进行放疗增敏的作用机制研究

作者：吴雅莉; 吴文强; 李华兵; 徐冉; 原海燕; 屈健; 唐甜甜; 鲁琼^*

来源：中药新药与临床药理, 2019, 30(03): 319-326.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2019.03.009

• MicroRNA-1246
• 姜黄素
• P53
• 膀胱癌
• T24细胞

目的探讨姜黄素对膀胱癌化疗增敏作用机制。方法对经过姜黄素和放射处理的T24细胞进行microRNA表达(miRNA芯片测序)、细胞活力(细胞增殖试验试剂盒)、集落形成、凋亡(AnnexinV-F)分析、ITC/7-AAD流式细胞计数(ITC/7-AAD)、miR-1246和p53mRNA(实时PCR)和蛋白质(Westernblot)表达的分析。结果芯片测序分析鉴定出17个差异表达的miRNA,在姜黄素处理的细胞中,与对照组相比,姜黄素显著降低T24细胞活力,并呈现浓度依赖性。miR-1246在T24细胞中的表达显著高于SV-HUC-1细胞,且高浓度的姜黄素(10或20μg·mL-1)可显著下调T24细胞miR-1246的表达。20μg·mL-1浓度的姜黄素组和放疗处理联合应用对抑制miR-1246的表达、细胞活力和集落形成的作用优于姜黄素或者进行单独放疗处理组。通过与对照组相比,抑制miR-1246显著降低T24细胞的存活率。转染antagomiR-1246可显著提高T24细胞处于G0/G1期细胞比例,而转染antagomiR-NC细胞则诱导细胞凋亡。荧光素酶试验显示,miR-1246的过表达会抑制p53 3‘-UTR基因的荧光素酶活性。结论 miR-1246通过靶向抑制p53基因在膀胱癌细胞中的表达,参与到姜黄素和放疗的抗肿瘤治疗中。

• 单位
  湖南省妇幼保健院; 中南大学湘雅二医院; 广州中医药大学