敲低lncRNA HAS2-AS1增加氧化应激促进CAL-27人口腔鳞癌细胞自噬性死亡

作者：王熙^*; 张淑悦; 王美艳; 刘彩虹; 谭铭博; 路文博; 袁博; 张琪

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(09): 825-830.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009468

• 长链非编码RNA透明质酸合成酶2反义转录本1(lncRNA HAS2-AS1)
• 口腔癌
• 自噬
• 细胞凋亡
• 氧化应激

目的 探究长链非编码RNA透明质酸合成酶2反义转录本1(lncRNA HAS2-AS1)基因对口腔鳞癌细胞自噬性死亡和氧化应激的影响。方法 采用RNA干扰技术沉默CAL-27人口腔鳞癌细胞HAS2-AS1基因，应用实时荧光定量PCR检测HAS2-AS1的表达，Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3BⅠ(LC3BⅠ)、 LC3BⅡ、自噬相关基因7(ATG7)、 P62、胱天蛋白酶3(caspase-3)、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、 caspase-9、 c-caspase-9、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)表达，免疫荧光细胞化学染色法检测细胞LC3B的表达，二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)负载检测细胞活性氧(ROS)的含量，流式细胞术检测细胞凋亡，试剂盒法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 敲低HAS2-AS1后，促进CAL-27细胞凋亡，提高细胞LC3BⅡ/LC3BⅠ、 c-caspase-9/caspase-9、 c-caspase-3/caspase-3、 BAX/Bcl2比值以及ATG7、 LC3B、 MDA及ROS水平，降低P62和SOD水平。结论 敲低HAS2-AS1增加细胞氧化应激促进口腔鳞癌细胞发生自噬性死亡。

• 单位
  承德护理职业学院; 唐山市人民医院; 华北理工大学