铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统分泌蛋白ExoU与耐药性的关系研究

作者:杨晓庆; 孙平*; 薛寒; 徐子辉
来源:中国临床药理学杂志, 2022, 38(19): 2324-2328.
DOI:10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.19.017

摘要

目的 分析铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统分泌蛋白ExoU与耐药性的关系。方法 收集21株铜绿假单胞菌,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测菌株exoU以及exoS基因携带情况,用琼脂稀释法测定头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、左氧氟沙星和环丙沙星对21株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),通过序列比对分析耐药基因突变情况,用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测铜绿假单胞菌中耐药相关基因(mexR,ampC和ampR)的表达量。结果 在21株铜绿假单胞菌中,有8株携带了exoU基因,13株携带了exoS基因,未发现同时携带exoU和exoS的菌株。药敏试验结果显示:所有携带exoU的菌株均对至少3种β内酰胺类药物具有耐药性。突变分析显示:在8株携带exoU的铜绿假单胞菌中,有6株存在T83I突变,其中5株存在gyrA(T83I)和parC(S87L)组合突变,并同时具有mexR,ampC和ampR基因突变。RT-PCR结果显示:携带exoU的菌株ampC与ampR基因的相对表达量较标准菌株PAO1明显增高,而携带exoS的菌株中其表达明显降低。mexR基因的相对表达量与二者相反。结论 携带exoU的铜绿假单胞菌具有更多与耐药基因相关的突变,进而导致其对氟喹诺酮类药物以及β内酰胺酶类药物耐药。

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